觸摸屏梯度PCR儀設(shè)計(jì)程序
1、常規(guī)PCR反應(yīng):
出現(xiàn)主菜單后,按standard或new方式編制要運(yùn)行的PCR程序,在輸入預(yù)變性的溫度及時(shí)間、變性的溫度及時(shí)間、退火的溫度及時(shí)間、延伸的溫度及時(shí)間、Sock的溫度后,按start/stop鍵開(kāi)始啟動(dòng)運(yùn)行當(dāng)前程序。
如果設(shè)計(jì)程序時(shí)選擇了CNTRL/TUBE命令,則程序啟動(dòng)后需要輸入反應(yīng)管的相應(yīng)型號(hào)和樣品體積。
——用SEL鍵選擇反應(yīng)管的型號(hào),用ENTER鍵確認(rèn)。
——輸入溶液體積,用Enter鍵確認(rèn)。
——當(dāng)程序運(yùn)行時(shí),按Opt鍵可以顯示大概的運(yùn)行時(shí)間和預(yù)期結(jié)束的時(shí)間。
2、
觸摸屏梯度PCR儀反應(yīng):
開(kāi)機(jī)后按照常規(guī)PCR反應(yīng)設(shè)置程序,按控制面板上的四個(gè)方向選擇鍵將閃爍的光標(biāo)移至程序退火這一步的數(shù)字序號(hào)處(一般為3),按住控制面板上的OPTIONS鍵,則進(jìn)入溫度梯度程序設(shè)計(jì)。
按方向選擇鍵將光標(biāo)移至G=0.0°(輸入數(shù)值范圍0-12),一旦輸入這個(gè)數(shù)值,即對(duì)樣品槽的每一列設(shè)定了不同的溫度,預(yù)設(shè)的溫度在樣品槽的中間,沿著樣品槽從做至右溫度依次升高。用0.2ml的管可設(shè)置12個(gè)不同的溫度,用0.5ml的管則可設(shè)置11個(gè)不同的溫度。在Option/Gradient中查看溫度分布。反應(yīng)槽zui高溫度不能超過(guò)99℃。
3、其它參數(shù)設(shè)置及說(shuō)明:
——T輸入溫度、循環(huán)次數(shù)、以及相關(guān)選項(xiàng)。
——±0.0°溫度變異量(±0.0°):每一個(gè)循環(huán)溫度增加或減少的量。必須注意溫度不能超過(guò)99℃。例如,變異量是+0.1℃,25個(gè)循環(huán),則起始溫度不能超過(guò)96.5℃。先輸入數(shù)值,然后輸入加減號(hào)。+:溫度上升;-:溫度下降。
——±0.00時(shí)間變異量(±S):輸入每個(gè)循環(huán)時(shí)間的增加或減少(zui大為1分鐘)
——R=3.0°/SRamp(K/S)代表了一個(gè)循環(huán)曲線的升降溫速率。這個(gè)值越高,則加熱或降溫就越快。允許值范圍:0.3-3.0K/S。
——±0.0°/SRampincrement(±S):輸入升降溫速率的變異量。該速率不能超過(guò)3K/S,因此,如果起始速率為0.3,變異量為0.1,則zui大循環(huán)次數(shù)為27個(gè)。